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Introdução a culturas de tecidos vegetais

A cultura de tecidos é uma técnica usada para cultivar plantas ou tecidos de plantas e órgãos a partir de uma única célula ou de uma pequena amostra de células. Este método requer algum conhecimento laboratório e habilidade, bem como equipamentos básicos de laboratório. Micropropagação, a produção clonal de plantas completas, é comumente usado para cultivar plantas em escala comercial. Algumas vantagens de cultura de tecidos e micropropagação são de que muitas plantas pode ser iniciado em um pequeno espaço-as plantas são mantidas em condições estéreis para a investigação ou até que estejam prontos para qualquer cultivo hidropônico ou tradicional.

História



  • As plantas têm um notável poder de regeneração, como evidenciado pela relativa facilidade com que podem ser enraizada, transplantado e enxertado. As tentativas iniciais de crescimento de plantas in vitro a partir de peças isoladas não tiveram sucesso, pois o conhecimento de nutrição da planta e fisiologia foi insuficiente. Com a descoberta de hormônios essenciais de plantas, algum progresso foi feito a partir dos anos 1920 e 30s.
    Um grande avanço foi feito por Philip R. White, em 1939, com o seu relatório a cultura contínua de cenoura e tabaco feito totalmente in vitro. Além disso progresso foi feito por Folke Skoog, que descobriu novas e importantes propriedades da auxina hormônio. Skoog, juntamente com Toshio Murashige, passou a desenvolver a solução de nutrientes de plantas padrão ainda amplamente utilizado --- Murashige-Skoog (MS) médio.

    Vídeo: Biotecnologia Vegetal - Micropropagação - Projeto Ilídio Pinho & CDLPC


    O trabalho iniciado por Kenneth Vivian Thimann no final dos anos 1950, que demonstrou que kinetin quebrou a dormência das gemas laterais, permitindo-lhes desenvolver-se como se estivessem nas pontas de plantas, abriu o caminho para avanços rápidos. A partir de então, novos e importantes resultados foram anunciados quase todos os anos. Hoje em dia quase todas as plantas podem ser cultivadas sob controlo de laboratório a partir de uma vasta gama de tecidos de partida.

Métodos de cultura de tecidos

  • Os principais métodos de cultura de tecidos são classificados de acordo com o material de partida. Algumas espécies podem ser iniciado facilmente a partir de um pedaço de folha de corte. Muitos podem ser cultivadas a partir de sementes in vitro, permitindo a geração de plantas que podem de outro modo ser difíceis de levantar. Cultura de embriões é similar às sementes de cultura, excepto os embriões são extraídos das sementes antes do início.

    Vídeo: Conceitos Práticos em Cultura Celular (Gibco) - Canal Biociências


    cultura de meristemas começa com raiz ou atirar excisadas dicas. Meristemas são as zonas crescendo ativamente nos vértices de raízes, brotos e botões laterais.
    Na cultura de calos, o crescimento do tecido indiferenciado que normalmente só aparecem em uma ferida é incentivada. números tremendas de células callus podem ser cultivadas como um material de partida para as plantas completamente desenvolvidas. Estas células semelhantes a tumores, deve ser induzido a formar a partir de (já) desenvolvidos tecidos diferenciados através do uso de produtos químicos. Do mesmo modo, as células de callus deve ser quimicamente tratados para a sua reversão de tecido diferenciado.

    Vídeo: Características do Tecidos Meristemáticos - Extensivo Biologia | Descomplica


    Murishage desenvolvido um sistema de classificação para descrever três fases distintas de micropropagação: Fase I, Fase estabelecimento- II, de multiplicação e a Fase III, de maturação.

estágio I



  • Na Fase I, um material de partida (o propulo) é seleccionada e preparada para a cultura. O primeiro passo é a desinfectar o material por imersão para um curto período de tempo numa solução de antibiótico, lixívia ou álcool. O explante é depois lavado e colocado num tubo de teste ou placa de petri contendo meio de cultura esterilizado. O meio de cultura é geralmente uma variação de meio MS contendo todos os elementos essenciais, vitaminas e hormonas para estimular o tipo desejado de crescimento. O meio semi-sólido é feito através da adição de agar.

Stage II



  • O objectivo da fase II é a proliferação de micropropagação de rebentos utilizando uma alta citocinina: auxina proporção. O 2,4-D hormona potente é usado aqui, se o tecido do calo é desejada. Para promover multiplicação filmagem, altas concentrações de cinetina, benzilaminopurina (BA) ou N6- (2-isopentenil) adenina (2iP) são usados ​​juntamente com uma forma instável ou baixa concentração de auxina. Esta combinação promove axilar ou adventive formação de rebentos enquanto inibe o crescimento da raiz.

    Vídeo: Tecidos Vegetais


    Uma característica-chave da Fase II é a facilidade com que muitos mais culturas pode ser derivada dela. Proliferam brotos são facilmente transferidos para outro Stage condições II para gerar rapidamente muitos mais tiros. Isto pode ser continuado indefinidamente até ocorrer uma contaminação ou as plantas apareça deformado.

estágio III

  • Durante a Fase III, o objetivo é formar plantas completas com sistemas radiculares e atirar viáveis. Isto é feito através da redução kinetins e fornecimento suficiente de auxina. Auxinas são adicionados directamente ao meio, ou as bases de rebentos pode ser mergulhado numa solução de auxina durante o transplante para novos meios de comunicação.
    Um procedimento de endurecimento é muitas vezes necessária para aumentar a capacidade de sobrevivência de Fase III plantas antes de envasamento. Isto é feito pelo aumento gradual da luz, reduzindo a humidade e permitindo que as plantas para detectar variações de temperatura aumentadas. Uma vez endurecido, a transferência para o solo ou outro meio de crescimento é a mesma que para qualquer outra planta, mas mais cuidado é necessário uma vez que as plantas tendem a ser ligeiramente menos forte em comparação com indivíduos tradicionalmente cultivadas.

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