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Como fazer Potato Dextrose Agar

ágar de dextrose de batata (PDA) é um bom para uso geral meio semi-sólido usado para a cultura de fungos. Muitas vezes, é utilizado para isolar, crescer e manter as espécies de formação de cogumelos. placas de Petri ou tubos de ensaio contendo PDA ready-made pode ser comprado, ou PDA pode ser feito rapidamente usando uma pré-mistura comercial. No entanto, não é difícil de fazer uma versão simples e eficaz a partir do zero em pouco custo.

Coisas que você precisa

  • 300 g de batatas descascadas, cortadas
  • Panela
  • coador de cozinha ou gaze
  • papel de teste de pH ou medidor de pH
  • 1 mole de ácido clorídrico
  • Hidróxido de sódio 1 molar
  • 4 frascos de 500 mL glass Ehrlenmayer (ou outros recipientes autoclaváveis ​​de boca estreita)
  • 10 g de dextrose (glicose) pó
  • 20 g de agar
  • A folha de alumínio
  • Panela de pressão
  • placas de Petri estéreis

Preparando extracto de batata

  • Coloque as batatas em uma panela com cerca de 1,2 litros de água da torneira e ferver num fogão durante 1 hora.

  • Remover panela do calor e deixe arrefecer líquido até que possa ser confortavelmente tratadas (cerca de 10 minutos).



  • Pour extracto de batata líquido através de um filtro ou gaze e recolhê-la em um outro recipiente.

Preparando o Médio

  • Adicionar dextrose e ágar a 1 litro de água do extracto de batata.



  • Testar o pH da solução com papel de teste de pH ou um medidor de pH.

  • Se o pH é acima de 6,5, ajusta-la para baixo através da adição de uma gota da solução de ácido clorídrico de cada vez e repetidos.

  • Se o pH é inferior a 6, ajustar-se por adição de uma gota de solução de hidróxido de sódio de cada vez e repetidos.

Esterilização

  • Misture bem a forma e dividi-lo em pequenos lotes de 250 mL vertida para os quatro frascos de 500 ml (Nota: cada frasco deve ser não mais do que metade cheio para evitar ebulição sobre o).



  • Cubra cada frasco com um pedaço de folha de alumínio levemente ondulados, de modo a folha não vai cair, mas não faz um selo apertado.

  • Colocar os frascos em uma panela de pressão.

  • Operar a panela de pressão de acordo com as instruções do fabricante para esterilizar o PDA a 121 graus C (250 graus F) a uma pressão de 103,421 Pascal (15 psi) durante 15 minutos.



  • Desligue a panela de pressão e deixe-o voltar à pressão atmosférica, em seguida, retire os frascos e deixe esfriar até que possam ser manipulados.

Verter o Médio

  • Line up as placas de Petri estéreis sobre uma superfície plana.

  • Uma vez que os frascos foram arrefecidos à temperatura de manuseamento, mas antes que o meio começa a solidificar, compreender um frasco com uma mão e retirar e anular a sua tampa de folha com a outra mão.

  • Para cada placa de Petri, levantar a tampa com uma mão, preencher rapidamente até a metade com PDA líquido, e substituir a tampa.

  • Repita Passo 3 acima até que todos petri côncavo são cheias.

  • Se houver qualquer PDA sobra, recuperar vagamente o frasco com a tampa da folha original, deixe esfriar e solidificar, aperte a tampa de alumínio e conservar no frigorífico.
  • Crédito da foto Zedcor Wholly Owned / PhotoObjects.net / Getty Images
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